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shRNA載體構(gòu)建

1、技術(shù)流程

基因的mRNA序列設(shè)計3條干擾片段（客戶不提供干擾序列，可由吉熒生物設(shè)計）；

把干擾片段設(shè)計成莖環(huán)結(jié)構(gòu)克隆到含U6啟動子或其他特定啟動子的載體中，測序驗證無誤；

把空載和干擾質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細胞；

用western blot檢測干擾效率，篩選到干擾效率最高的片段可用于后續(xù)的研究。

2、客戶需提供

客戶提供干擾序列：需要提供RNA干擾的目的基因的名稱（或Gene Bank號）、序列，并與我們共同討論實驗方案；

客戶不提供干擾序列：由吉熒生物代為設(shè)計三條siRNA干擾序列。 

3、報告內(nèi)容及標準

siRNA/shRNA序列；

構(gòu)建的載體以及測序報告；

熒光定量PCR檢測報告/Western blot檢測報告等；

具體實驗方法、步驟、所用試劑、儀器及相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。